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1. 為什么沒加藥的實(shí)驗(yàn)組里,同一組的腫瘤大小和形態(tài)差距很大?
答:并非所有的腫瘤都能夠有均一形態(tài)規(guī)則,腫瘤體積差距很大可能與小鼠周齡及接種細(xì)胞量不一致導(dǎo)致,建議使用周齡較小的裸鼠,細(xì)胞接種時(shí)對細(xì)胞懸液進(jìn)行充分重懸。
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2. 一只小鼠身上只能注射一個(gè)點(diǎn)嗎?
答:是的,多點(diǎn)位皮下注射的腫瘤可能會(huì)相互影響。
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3. 為什么加了基質(zhì)膠的情況下,小鼠的腫瘤長起來之后又消失了?
答:腫瘤塊先縮小,后變大是比較常見的,可能是炎癥反應(yīng)造成的。一方面,基質(zhì)膠在早期將腫瘤固定在皮下后,由于注射量極少,小鼠首先會(huì)吸收基質(zhì)膠,之后可能有一部分腫瘤細(xì)胞被小鼠自身吸收,您可以繼續(xù)觀察2周。另一方面,您還需要考慮細(xì)胞本身成瘤性、細(xì)胞活力以及細(xì)胞注射量等因素,如果可能是這方面原因造成的,需要再次進(jìn)行驗(yàn)證。若排除完上述問題后仍有問題,可以聯(lián)系售后經(jīng)理進(jìn)行深入分析探討。
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4. 我該怎么選擇小鼠的品系進(jìn)行皮下成瘤?
答:一般情況下,建議使用裸鼠(BALB/c-nu/nu),BALB/c-nu/nu沒有胸腺等免疫器官,對腫瘤細(xì)胞沒有免疫作用,易于成瘤。
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答:不是的,培養(yǎng)類器官時(shí)需要觀察類器官的尺寸,并通過傳代等方式進(jìn)行控制。這主要是由于類器官內(nèi)部缺乏循環(huán)系統(tǒng)造成的。當(dāng)類器官的尺寸較大時(shí),靠近中心的細(xì)胞難以和外界進(jìn)行氧氣和營養(yǎng)成分的交換,易凋亡,不利于后續(xù)的檢測。
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6. 面積不同的培養(yǎng)板應(yīng)該使用基質(zhì)膠的體積是多少?
答:答:基質(zhì)膠體積的用量需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)孔數(shù)決定,建議基質(zhì)膠與細(xì)胞混合后占比不少于70% ,我們提供細(xì)胞-基質(zhì)膠懸液的推薦種板體積,您可以根據(jù)我們提供的數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算,建議種板時(shí)適當(dāng)擴(kuò)大膠滴直徑。
表1 模基生物推薦類器官種板體積
細(xì)胞培養(yǎng)板規(guī)格 96孔 48孔 24孔
細(xì)胞-基質(zhì)膠懸液體積(μL) 3~8 12~20 20~30
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7. ?;锾峁┑念惼鞴俨僮髡f明里,為什么要在種板后倒扣培養(yǎng)板?
答:答:倒扣是為了更好地使基質(zhì)膠形成穹頂狀凝膠,且倒扣細(xì)胞培養(yǎng)板可以較好地避免細(xì)胞因重力或其他因素沉底產(chǎn)生貼壁現(xiàn)象。操作時(shí)應(yīng)當(dāng)注意翻轉(zhuǎn)過程,不可用力過猛。
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8. 所有細(xì)胞都能進(jìn)行類器官培養(yǎng)嗎?
答:答:現(xiàn)有的研究中,常見的類器官可以根據(jù)起始細(xì)胞的類型分為腫瘤組織來源的腫瘤類器官、干細(xì)胞來源的類器官以及正常組織來源的類器官。
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9. 為什么我在種板時(shí)基質(zhì)膠會(huì)攤開?
答:這可能與培養(yǎng)板有關(guān),我們建議使用TC處理后的培養(yǎng)板進(jìn)行操作。
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答:建議最少將基質(zhì)膠稀釋至濃度不低于4mg /mL,且需要確?;|(zhì)膠完全溶解于稀釋體系中。每批產(chǎn)品的分析證明書中我們會(huì)附上最大可凝稀釋比例,可以作為客戶實(shí)驗(yàn)的參考。