血管生成是正常組織生長(zhǎng)及損傷修復(fù)的必要過程,是從已有的毛細(xì)血管或毛細(xì)血管后靜脈發(fā)展而形成新的血管。血管生成還涉及許多生物過程,包括繁殖、發(fā)育、修復(fù),比如腫瘤生成,腫瘤組織具有高度血管化的特征,腫瘤的生長(zhǎng)依賴于新生血管,新生血管也可能是腫瘤治療的靶標(biāo)。體外的血管生成實(shí)驗(yàn)?zāi)芎芎玫哪M腫瘤的血管發(fā)生過程,并且適合研究藥物對(duì)這一過程的影響實(shí)驗(yàn)。
本周?;镆訦UVEC細(xì)胞為例,選?。?0224503XHZ、20224505XWZ兩批次進(jìn)行了血管生成方面評(píng)定,并與大家分享一些?;飳?duì)基質(zhì)膠成管方面的一些評(píng)測(cè),希望對(duì)大家選擇基質(zhì)膠有所幫助。
一.
樣本信息
二.
實(shí)驗(yàn)流程
詳細(xì)實(shí)驗(yàn)過程請(qǐng)查看公眾號(hào)發(fā)文:血管形成實(shí)驗(yàn)——熟練篇
三.
結(jié)果分析
HUVEC細(xì)胞成管4H圖
此外我們?cè)诔晒芊矫孢€做了不少極限測(cè)試,如:
1.基質(zhì)膠反復(fù)凍融測(cè)試
詳細(xì)實(shí)驗(yàn)過程請(qǐng)查看公眾號(hào)發(fā)文:ABW基質(zhì)膠極限測(cè)試報(bào)告 一:反復(fù)凍融15次會(huì)怎么樣?
?;|(zhì)膠在反復(fù)凍融15次后依舊有良好的成管能力。
2.成管4℃靜置60天測(cè)試
詳細(xì)實(shí)驗(yàn)過程請(qǐng)查看公眾號(hào)發(fā)文:ABW基質(zhì)膠極限測(cè)試報(bào)告二:4°C靜置60天會(huì)怎么樣?
?;|(zhì)膠在4℃靜置60天后依舊能保持細(xì)胞較好成管。
3.基質(zhì)膠低濃度、低剛性成管培養(yǎng)
?;|(zhì)膠在10倍稀釋,低濃度、低剛性下歷經(jīng)8天完成成管。
以下是各類細(xì)胞血管生成的圖片
四.
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
1.?;锘|(zhì)膠經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)檢驗(yàn)證,具備安全性高、濃度多樣性、批次穩(wěn)定性好、低內(nèi)毒素、無污染。
2.?;锘|(zhì)膠批間穩(wěn)定性高,成管效果好。
3.?;锘|(zhì)膠凝膠穩(wěn)定,在經(jīng)歷各種極限條件下依舊能良好成管(正常實(shí)驗(yàn)不建議反復(fù)凍融及過長(zhǎng)時(shí)間4℃存放,以確保基質(zhì)膠性能最佳)。
五.
注意事項(xiàng)
1.HUVEC 細(xì)胞容易沉底,易使孔間細(xì)胞數(shù)量不一致,細(xì)胞數(shù)量過多或過少都會(huì)影響成管結(jié)果,每孔加樣前需用移液器吹打混勻。
2.基質(zhì)膠濃度高時(shí),移液器吸入的體積可能不準(zhǔn),可用無菌剪剪去槍頭前端后再去吸入基質(zhì)膠。
3.實(shí)驗(yàn)前一天無血清饑餓細(xì)胞,第二天成管效果會(huì)更好。
4.對(duì)于涉及顏色檢測(cè)的實(shí)驗(yàn),推薦使用無酚紅模基基質(zhì)膠(082706),如使用熒光染料或 Drabkins 法計(jì)數(shù)內(nèi)皮細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn)。此外,酚紅和非甾體雌激素結(jié)構(gòu)類似,有類雌激素效應(yīng),在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)可能具有干擾內(nèi)分泌和荷爾蒙代謝的能力。
六.
文獻(xiàn)
以下是引用Mogengel基質(zhì)膠產(chǎn)品發(fā)表血管生成方面的文章。